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biogenes大腸桿菌|360-HCP ELISA說明書

更新時間:2022-03-17      點擊次數(shù):2077

 

biogenes大腸桿菌|360-HCP ELISA說明書

大腸桿菌細(xì)胞廣泛用于生物制藥的生產(chǎn)。在藥物開發(fā)過程中,殘留宿主細(xì)胞蛋白 (HCP) 的分析對于確保生物制藥的質(zhì)量和安全非常重要。對于大腸桿菌,HCP 模式受應(yīng)用制造條件的強烈影響。僅使用一組抗體的傳統(tǒng)通用測定法并不能充分代表這種多樣性。為了克服與傳統(tǒng)通用 HCP 檢測相關(guān)的限制,BioGenes 開發(fā)了增強型通用 E.coli|360-HCP ELISA,它由一組四種不同的通用試劑盒組成。

大腸桿菌中的 HCP模式受多種因素影響

大腸桿菌中的 HCP 模式取決于內(nèi)在和外在因素。

1)大腸桿菌菌株的遺傳背景

不同大腸桿菌菌株的基因組表現(xiàn)出顯著的多樣性。典型的大腸桿菌基因組編碼約。4,500 - 5,000 個基因,其中大約 50% 的基因存在于核心基因組中。據(jù)估計,大腸桿菌的泛基因組包括約。128,000 個基因,因此攜帶了大量潛在的 HCP 物種。

2) 細(xì)胞培養(yǎng)條件

大腸桿菌的基因表達(dá)高度依賴于細(xì)胞的生長階段、培養(yǎng)基和補充劑的類型以及生長條件。中樞代謝途徑的重組、應(yīng)激相關(guān)基因的表達(dá)和底物降解酶的分泌主要受營養(yǎng)物質(zhì)的有效性和細(xì)胞應(yīng)激條件(如溫度、氧氣和鹽度)的影響。

3) 重組藥物的性質(zhì)

重組(外來)蛋白的過表達(dá)可導(dǎo)致重組菌株的蛋白質(zhì)組在代謝功能蛋白、伴侶蛋白和熱休克蛋白的表達(dá)模式方面發(fā)生顯著變化。

 

 

為什么有四種套件類型?

所有這些條件共同影響了在大腸桿菌發(fā)酵過程中發(fā)生的* HCP 譜,沒有單一的通用試劑盒能夠檢測每一個 HCP。E.coli|360-HCP ELISA
使用不同組的抗 HCP 抗體提供更高的檢測特異性和靈敏度,分為四種試劑盒類型(A 型、C 型、D 型、E 型),用于優(yōu)化 HCP 檢測。

  • 大腸桿菌抗原的遺傳背景:BL21 (DE3) & W3110

  • 發(fā)酵培養(yǎng)基:LB培養(yǎng)基和礦物培養(yǎng)基

由于難以預(yù)測大腸桿菌中的 HCP 譜,我們建議先測試所有四種試劑盒類型,然后根據(jù) ELISA 關(guān)鍵參數(shù)(如稀釋線性、準(zhǔn)確度和總覆蓋率)選擇性能最佳的試劑盒。

 

 

類型細(xì)胞系生長培養(yǎng)基
A型(第二代即將發(fā)布)BL21 (DE3)礦物介質(zhì)
E型W3110礦物介質(zhì)
D型(第二代即將發(fā)布)BL21 (DE3)LB培養(yǎng)基
C型W3110LB培養(yǎng)基

請注意:在 360-HCP ELISA 試劑盒中從 Triton™ X-100 轉(zhuǎn)換為 TWEEN®20

根據(jù) REACH(化學(xué)品的注冊、評估、授權(quán)和限制)法規(guī) (EC) No 1907/2006 的附件 XIV,Triton™ X-100(包含 4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯酚,乙氧基化)將在 2021 年 1 月 1 日之前在我們所有的 ELISA 試劑盒組件中被 TWEEN®20(聚山梨醇酯 20)取代。

 

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